2×Taq PCR Master Mix (with dye)
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
| DY10301 | 2×Taq PCR Master Mix（with Dye） | 5×1 mL | 168 |
产品描述
本产品是即用型的常规PCR预混液，是将Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2以及优化的反应缓冲液配制成的2倍浓度的混合物，反应时只需加入引物和模板即可进行扩增，简化了操作过程，并减少了PCR操作过程中的污染。本产品中含有染料，染料的加入不影响PCR反应，PCR后，可直接进行电泳，节省时间。本产品可用于常规PCR鉴定、小片段目标基因克隆、平端PCR产物加A实验。
保存方式
-20 ℃保存，有效期2年。
产品特点
快捷：PCR反应所必需试剂集一管之中，数分钟即可完成反应体系配制
便利：PCR反应后可直接电泳（含染料）
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8 kb，可高效扩增≤4 kb片段
灵敏：可从0.05 ng人基因组DNA 模板中扩增出特定基因片段
稳定：可经受反复冻融。4℃放置30天，室温放置1周后，扩增性能不受影响
常用反应体系（50μL）
组分 | 用量 |
2×Taq PCR Master Mix (with dye) | 25 μL |
上游引物 | 0.2-1.0 μM（终浓度） |
下游引物 | 0.2-1.0 μM（终浓度） |
模板DNA | 1-50 ng（质粒）；10 ng-1 μg（基因组） |
灭菌ddH2O | 至 50 μL |
备注：Mg2+终浓度为2mM
扩增程序
扩增片段＜3K 扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）
94℃ | 1分钟30秒 | 94℃ | 5分钟 | ||||
30次循环： | { | 94℃ | 20秒 | 30次循环： | { | 94℃ | 5秒 |
50-60℃ | 20秒 | 68℃ | 60秒/Kb | ||||
72℃ | 60秒/Kb | 72℃ | 5分钟 | ||||
72℃ | 5分钟 | 4℃ | 保温 | ||||
4℃ | 保温 |
使用建议
1.使用本试剂扩增得到的PCR产物 3´ 端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中；
2.需要融解混匀后使用，防止离子浓度不均匀；
3.应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足；循环数过多，扩增量增加，但突变率也会增加，并造成非特异性扩增；
4.根据引物Tm值设置合适退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增；过高可能扩增失败。
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