D-Luciferin,Potassium Salt D-荧光素钾盐 

产品信息

产品描述

荧光素（ D-Luciferin）是萤火虫荧光素酶底物，其量子效率为0.88，是鲁米诺（Luminol）的20倍。D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。常见的有三种产品形式：D-荧光素（游离酸），D-荧光素盐（钠盐和钾盐）。其主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，后者易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，适合体内实验。

产品参数

中文名：D-荧光素钾盐

英 文 名 ：(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt;D-Luciferin firefly,potassium salt

CAS：115144-35-9

分子式：C11H7N2O3S2K  

分子量：318.42 g/mol

外观：淡黄色粉末

纯度（HPLC）：≥99%

溶解度：易溶于水（60 mg/mL） (最大溶解度)

保存方式

-25~ -15℃干燥避光储存，有效期1年。

使用方法

1.体外生物发光检测

1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30 mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度。

3）去除细胞培养基。

4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10 min，然后进行图像分析。 

2.活体成像分析方法

1）用无菌的DPBS（without Mg²⁺、Ca²⁺）配置D-Luciferin储存液（15 mg/mL）。

2）现配现用；或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

3）腹腔注射，按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。如10 g重小鼠，注射100 μL工作液（1.5 mg D-Luciferin）。

4）腹腔注射10～15min后（待光信号达到最强稳定平台期），上机进行图像分析。

注：建议对每只动物模型建立荧光素酶动力曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

3.植物荧光素酶互补成像分析(LCA)或荧光素酶报告基因检测成像观察

由于荧光素钾盐为微量药品，为了最大程度减少药品称量造成的损失，延长保存时间，建议参考以下溶液配置方法使用。

1.1配置方法(100 mg/瓶)

在试剂瓶加入 3.14 mL无菌去离子水，充分颠倒混匀，直到药品完全溶解，即获得100 mM的储备液。

1.2配置方法(1 g/瓶)

使用分析天平精确称取0.0318 g的荧光素钾盐，加入1 mL 的无菌去离子水，完全溶解后，即为100 mM的荧光素钾盐母液。

2.配制1 mM 荧光素钾盐底物工作液：将母液用无菌去离子水稀释到1 mM 荧光素底物工作液，避光冰上暂存，用于涂抹烟草叶片。

3.烟草叶片涂抹荧光素底物后，黑暗放置10 min后，置于化学发光成像仪中观察。

注：配置好的荧光素钾盐母液可在-80℃避光保存1年，-20℃避光保存6个月；工作液可在-20℃避光保存1个月；建议分装后保存，避免反复冻融。

注意事项：

1.本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）仅仅是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid。

2.注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

3.如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。

4.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间长达1年。

5.在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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D-荧光素钾盐