SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
SDS-PAGE Gel Preparation Kit
产品信息
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 | 价格（元） |
| DY50004 | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 50 T | 210 |
产品描述
本产品包括 SDS-PAGE 凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷。
产品组成
货号 | 名称 | 规格 |
DY50004-A | 1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 100mL |
DY50004-B | 0.5M Tris-HCl,pH6.8 | 50mL |
DY50004-C | 30% Acr-Bis(29:1) | 100mL |
DY50004-D | 10%SDS | 5mL |
DY50004-E | 过硫酸铵（APS） | 0.5g |
DY50004-F | TEMED | 0.6mL |
保存方式
试剂盒2-8℃保存。 10% SDS低温会析出，需要37摄氏度溶解。效期1年。过硫酸铵溶解分装后保存于-20℃, 半年内有效。
使用方法（仅供参考）（以 1.0mm 厚 mini 胶为例）
一、灌制分离胶
1．参照凝胶模具说明书，装配好模具。
2．取相应体积的 30% Acr-Bis（29:1）、分离胶缓冲液和双蒸水（参照附表）在小烧杯或试管中混合。
3．加入 10% APS 溶液和 TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．注入模具（留少许以判断凝胶状态），避免产生气泡，凝胶混合液加至距前玻璃板顶端约 1.5 cm 或距梳齿 0.5 cm，轻轻加入 1 mL 水覆盖封胶，使分离胶表面保持平整。
5．静置 30-60 分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
二、灌制浓缩胶
1．倒掉覆盖在分离胶上的水层。
2．将相应体积的 30% Acr-Bis（29:1）、浓缩胶缓冲液和双蒸水（参照附表）在一个小烧杯或试管中混合。
3．加入 10% APS 和 TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4．将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，避免产生气泡，直至前玻璃板的顶端。
5．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6．静置 10~20 分钟，待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，避免破坏加样孔。
7．进行常规电泳操作。使用 Tris 甘氨酸电泳液建议电泳条件：初始电压 80V，约 30 分钟，样品进入分离胶后，电压调至 120V，约 1 小时，样品抵达凝胶底部停止电泳。
附件：
表一 分离胶的配制
各组分名称 | 各种凝胶体积所对应的各种组分的取样量 | |||||||
5ml | 10ml | 15ml | 20ml | 25ml | 30ml | 40ml | 50ml | |
6% Gel | ||||||||
双蒸水 | 2.65 | 5.3 | 7.95 | 10.6 | 13.25 | 15.9 | 21.2 | 26.5 |
30% Acr-Bis | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 10 |
1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 | 6.25 | 7.5 | 10 | 12.5 |
10% SDS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
10% APS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
TEMED (uL) | 4 | 8 | 12 | 16 | 20 | 24 | 32 | 40 |
8% Gel | ||||||||
双蒸水 | 2.35 | 4.6 | 6.95 | 9.3 | 11.55 | 13.9 | 18.5 | 23.2 |
30% Acr-Bis | 1.3 | 2.7 | 4 | 5.3 | 6.7 | 8 | 10.7 | 13.3 |
1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 | 6.25 | 7.5 | 10 | 12.5 |
10% SDS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
10% APS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
TEMED (uL) | 3 | 6 | 9 | 12 | 15 | 18 | 24 | 30 |
10% Gel | ||||||||
双蒸水 | 1.95 | 4 | 5.95 | 7.9 | 9.95 | 11.9 | 15.9 | 19.8 |
30% Acr-Bis | 1.7 | 3.3 | 5 | 6.7 | 8.3 | 10 | 13.3 | 16.7 |
1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 | 6.25 | 7.5 | 10 | 12.5 |
10% SDS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
10% APS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
TEMED (uL) | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 16 | 20 |
12% Gel | ||||||||
双蒸水 | 1.65 | 3.3 | 4.95 | 6.6 | 8.25 | 9.9 | 13.2 | 16.5 |
30% Acr-Bis | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 16 | 20 |
1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 | 6.25 | 7.5 | 10 | 12.5 |
10% SDS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
10% APS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
TEMED (uL) | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 16 | 20 |
15% Gel | ||||||||
双蒸水 | 1.15 | 2.3 | 3.45 | 4.6 | 5.75 | 6.9 | 9.2 | 11.5 |
30% Acr-Bis | 2.5 | 5 | 7.5 | 10 | 12.5 | 15 | 20 | 25 |
1.5M Tris-HCl, pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 | 6.25 | 7.5 | 10 | 12.5 |
10% SDS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
10% APS (uL) | 50 | 100 | 150 | 200 | 250 | 300 | 400 | 500 |
TEMED (uL) | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | 12 | 16 | 20 |
表二 浓缩胶的配制
各组分名称 | 各种凝胶体积所对应的各种组分的取样量 | |||||||
1ml | 2ml | 3ml | 4ml | 5ml | 6ml | 8ml | 10ml | |
4% Gel | ||||||||
双蒸水 | 0.6 | 1.19 | 1.79 | 2.39 | 2.98 | 3.58 | 4.77 | 5.97 |
30% Acr-Bis | 0.13 | 0.27 | 0.4 | 0.53 | 0.67 | 0.8 | 1.07 | 1.33 |
0.5M Tris-HCl, pH6.8 | 0.25 | 0.5 | 0.75 | 1 | 1.25 | 1.5 | 2 | 2.5 |
10% SDS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
10% APS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
TEMED (uL) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 10 |
5% Gel | ||||||||
双蒸水 | 0.56 | 1.15 | 1.73 | 2.2 | 2.78 | 3.35 | 4.51 | 5.55 |
30% Acr-Bis | 0.17 | 0.33 | 0.5 | 0.67 | 0.83 | 1 | 1.33 | 1.7 |
0.5M Tris-HCl, pH6.8 | 0.25 | 0.5 | 0.75 | 1 | 1.25 | 1.5 | 2 | 2.5 |
10% SDS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
10% APS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
TEMED (uL) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 10 |
6% Gel | ||||||||
双蒸水 | 0.53 | 1 | 1.59 | 2.12 | 2.65 | 3.18 | 4.24 | 5.3 |
30% Acr-Bis | 0.2 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1 | 1.2 | 1.6 | 2 |
0.5M Tris-HCl, pH6.8 | 0.25 | 0.5 | 0.75 | 1 | 1.25 | 1.5 | 2 | 2.5 |
10% SDS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
10% APS (uL) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 80 | 100 |
TEMED (uL) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 8 | 10 |
注意： 如果配制非变性胶，参考上述配方，不加10%SDS即可配制成非变性PAGE胶。
注意事项
1. APS 溶液常温不稳定，取用后立即放回-20 ℃冰箱；若发现凝胶时间延长，应更换 APS 溶液。
2. PAGE 凝胶的凝聚速度与温度以及 APS、TEMED 的用量密切相关；可通过增加 50%-100%的 APS 及TEMED 的用量，加快 PAGE 凝胶的聚合速度，但凝胶聚合过快不利于操作。
3. 在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
4. 在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不能太快。
5. 丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿戴实验服和一次性手套。